诺如病毒测试试剂盒及检验方式

【技术领域】

[0001]本发明牵涉生物测试领域，详细牵涉一种诺如病毒测试试剂盒及测试方式。

【背景技术】

[0002]诺瓦克病毒(,NV)是人类叶状病毒科(Human,HuCV)中诺如病毒(，NV)属的原型代表株。NV是一组型态相同、抗原性略有不同的病毒颗粒。诺瓦克病毒最早是从1968年在法国诺瓦克市暴发的一次急性胃炎的病患尿液中分离的病原。随后，世界各地相继自结肠炎病人尿液中分离出多种型态与之相同但抗体性略异的病毒样颗粒，均以发觉地点命名，如:Virus(HV)、Snow(SMV)>Virus(MxV)Virus(SOV)等，先是称为小圆结构病毒(SmallRoundVirus,SRSV),后称为诺瓦克样病毒(-likevirus,NLV)。直到2002年8月第八届国际病毒命名执委会批准名称为诺如病毒(，NV)。诺如病毒与在美国发觉的东京样病毒(-likeVirus，SLV)，目前的即将名称为札如病毒(,SV),也称为人类叶状病毒。

[0003]NV有许多共同特点:半径约为26?35nm，无包膜，表面粗糙，球状，呈二十面体对称；从急性胰腺炎患者的尿液中分离，不能在细胞或组织中培养，也没有合适的植物模型；基因组为单股正链RNA;在氯化铯密度梯度中的压强密度为1.36?1.41g/cm3;电镜下缺少明显的型态学特性，负染色电镜相片显示，NV是具备典型的荚果外侧，表面有裂痕的小圆状结构病毒。

[0004]诺如病毒传染性贫血是由诺如病毒属病毒导致的贫血，具备发病急、传播速率快、涉及范围广等优点，是导致非真菌性贫血暴发的主要原因。诺如病毒传染性强，以胃肠传播为主，可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播，常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及部队等处引起集体暴发。

[0005]诺如病毒遗传高度变异，在同一时期和同一社区内或许存在遗传特征不同的毒株流行。诺如病毒抗原没有明显的保护作用，尤其是没有常年免疫保护作用，极易导致反复传染。

[0006]诺如病毒传染性贫血在全世界范围内均有流行，全年均可发生传染，传染对象主要是成人和学龄婴儿，潮湿秋天展现易发。中国每年在所有的非真菌性贫血暴发中，60-90%是由诺如病毒导致。德国、英国、日本、澳大利亚等发达国家也都有类似结果。在发展中国家，诺如病毒传染性贫血普遍存在，也常造成暴发流行。在我国5岁以下头痛婴儿中，诺如病毒检出率为15%左右，血浆抗原水平调查阐明我国人群中诺如病毒的传染亦非常普遍。1995年，我国报导了首例诺如病毒传染，之后山西、北京、安徽、福州、武汉、广州等地区先后发生多起诺如病毒传染性贫血暴发灾情。

[0007]现在，该项目测试主要应用的测试方式为:直接电镜法(EM)、免疫电镜法(IEM)、放射免疫法(RIA)、生物素-亲和素免疫法(B1tin-)和酶联免疫法(ELISA)、杂交技术和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方式进行测试。并且，这种测量方式均须要依赖相应的仪器设备、并须要使用液体试剂等，不适于实地测试，并且试剂的保存和使用也遭到限制，也不方便迅速简便的得到试验结果。

[0008]因此，现在还要一种才能初期、快速、简便、可靠地确诊诺如病毒的方式。

【发明内容】

[0009]为解决上述技术问题，本发明提供一种诺如病毒测试试剂盒及检验方式。

[0010]本发明选用的技术方案如下:

[0011]本发明提供一种诺如病毒测试试剂盒，包括样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸水滤膜和反应支持物；其中，所述样品垫、所述胶体金垫、所述乙酸纤维素膜、所述吸水滤膜依次设置在所述反应支持物上；所述样品垫设置在所述反应支持物的底端，所述样品垫的顶部压住处述胶体金垫的底端并与之黏贴，所述胶体金垫的顶部压住处述乙酸纤维素膜的底端并与之黏贴，所述乙酸纤维素膜的顶部被所述吸水滤膜的底端挡住并与之黏贴。

[0012]优选的，所述吸水滤膜宽度为33.0_，所述吸水滤膜与所述乙酸纤维素膜重叠黏贴在一起的重叠宽度为1.0mm。

[0013]优选的，所述胶体金垫的宽度为6.0mm，所述胶体金垫与所述乙酸纤维素膜重叠黏贴在一起的重叠宽度为1.0mm。

[0014]优选的，所述样品垫的宽度为25.0mm，所述样品垫与所述胶体金垫重叠黏贴在一起的重叠宽度为2.0mm。

[0015]优选的，所述胶体金垫为富含胶体金标记的诺如病毒衣壳蛋白单克隆抗原的胶体金垫。

[0016]优选的，所述乙酸纤维素膜设置有检查条带和质控条带，所述测试条带设置于紧靠所述胶体金垫的两侧并富含诺如病毒衣壳蛋白单克隆抗原，所述质控条带设置于避开所述胶体金垫的两侧并富含羊抗鼠IgG多克隆抗原。

[0017]优选的，所述反应支持物为塑胶。

[0018]本发明提供一种应用诺如病毒测试试剂盒进行诺如病毒测试的方式，包括以下方法:

[0019](I)将待检样本用稀释液处理；其中，所述待检样本为尿液或则头痛物；

[0020](2)将稀释好的样本滴加至诺如病毒测试试剂盒的样品垫上；样本将依次顺着反应支持物上的各个粘附物向吸水滤膜的方向联通；

[0021](3)若所述样本中富含诺如病毒，则诺如病毒中的诺如病毒衣壳蛋白在经过所述胶体金垫的过程中，与所述胶体金垫标记的诺如病毒衣壳蛋白单克隆抗原特异性结合产生复合物；所述复合物在经过所述乙酸纤维素膜的过程中，依次与相对于所述复合物不足量的诺如病毒衣壳蛋白单克隆抗原以及羊抗鼠IgG多克隆抗原特异性结合；则检查条带处出现白色或粉蓝色，样本为阴性；

[0022]若所述样本中不富含诺如病毒，则测量条带处未出现白色或粉蓝色，样本为阳性:

[0023](4)假如质控条带处出现白色或粉蓝色，则阐明试验结果有效；假如质控条带处未出现白色或粉蓝色诺如病毒检测，则阐明胶体金失效或则试验操作有误，试验结果无效。

[0024]优选的，方法(I)中，使用2%的NP40和0.5%的十二羰基苯磺酸钠的0.02M乙酸盐缓冲液作为样品稀释液，稀释待检样本。

[0025]本发明的有益疗效如下:

[0026]本发明提供的诺如病毒测试试剂盒，才能简化尿液或则头痛物样本中诺如病毒的测试步骤。运用该种测试试剂盒测试诺如病毒诺如病毒检测，不对任何试验仪器、环境或则操作人员具备依赖性，操作简略、方便、检测周期短、易于判读；另外，不须要特殊的仪器设备，不须要专业轮训，适应性强，易于随时随地的检测和检测。

[0027]本发明提供的测试方式操作简略便捷、不依赖较高试验室条件、用于迅速检查诺如病毒，从而实现迅速简便的辅助确诊肠炎等相关病症的症状。

【附图说明】

[0028]图1是本发明的一个测试试剂盒的正面示意图；

[0029]图2是本发明的一个测试试剂盒的侧面示意图；

[0030]图3是本发明的一个测试试剂盒测试结果阴性示意图；

[0031]图4是本发明的一个测试试剂盒测试结果阳性示意图；

[0032]图5是本发明的一个测试试剂盒结果无效示意图；

[0033]图6是本发明的一个测试试剂盒结果无效示意图。

[0034]其中:1、吸水滤膜；2、硝酸纤维素膜；3、胶体金垫；4、样品垫；5、反应支持物；T、检测条带；C、质控条带。

【具体施行方法】